应用:凝胶色谱不但可以用于分离测定高聚物的相对分子质量和相对分子质量分布,同时根据所用凝胶填料不同,可分离脂溶性和水溶性物质,分离相对分子质量的范围从几百万到100以下。近年来,凝胶色谱也广泛用于小分子化合物。相对分子质量相近而化学结构不同的物质,不可能通过凝胶渗透色谱法达到完全分离纯化的目的。凝胶色谱不能分辨分子大小相近的化合物,相对分子质量相差需在10%以上才能得到分离。
原理:凝胶具有化学惰性,它不具有吸附、分配和离子交换作用。让被测量的高聚物溶液通过一根内装不同孔径的色谱柱,柱中可供分子通行的路径有粒子间的间隙(较大)和粒子内的通孔(较小)。当聚合物溶液流经色谱柱(凝胶颗粒)时,较大的分子(体积大于凝胶孔隙)被排除在粒子的小孔之外,只能从粒子间的间隙通过,速率较快;而较小的分子可以进入粒子中的小孔,通过的速率要慢得多;经过一定长度的色谱柱,分子根据相对分子质量被分开,相对分子质量大的在前面(即淋洗时间短),相对分子质量小的在后面(即淋洗时间长)。溶质的淋出体积与其分子量有关,分子量愈大,其淋出体积愈小。
a. 常温流动相: 水相、THF、DMF、DMSO、三氯甲烷、六氟异丙醇、a-氯奈;
b. 高温流动相:DMF(80℃),三氯苯;
c. 可以测相对分子量的流动相:水相、THF、DMF、DMSO、三氯甲烷、六氟异丙醇、a-氯奈、三氯苯
d .可以测####分子量的流动相:水相、THF、DMF、三氯苯
不同流动相对应的分子量范围:DMF:3000-100万;THF:500-200万;水相:300-50万;氯仿相:500-200万。分子量接近限值的,测试不太准确,低于下限会跟溶剂峰连在一起测不准。
1.样品量:可为液体、粉末、块状样品,粉末样品10mg,液体5-10ml;
2.要求在指定流动相中有较好的溶解性,送样前需要自行确认好样品在指定流动相中的溶解性,难溶样品##自行溶好再送样, 溶解后的样品要透明均一,过滤头不堵;如果样品溶解性较差,要求提前溶解好(浓度要求在2-5mg /ml左右),或者提供合理溶解方法(如果由实验室溶解,费用问题请提前咨询)
3.样品溶好之后,有机相样品需要过0.45 μm滤膜,水相样品需要过0.22 μm滤膜,样品浓度一般控制在2-5 mg/mL;样品溶好过滤膜后,可能会损失部分样品信息,建议##送粉末;



